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《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法羟胺三氯化铁法》(WS-T66-1996)
资料介绍
《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法羟胺三氯化铁法》(WS-T66-1996)
1主题内容与适用范圃
本标准规定了血中胆碱酯酶活性的分光光度测定方法一一羟胺三氯化铁法。本法最低检测浓度为2.4 pumol/L.本标准适用于正常人和接触有机磷农药人员血中胆碱酯酶活性的测定。2原理
血液胆碱酯酶使乙酰胆碱分解为胆碱和乙酸。未被胆碱酯酶水解而剩余的乙酰胆碱与碱性羟胺反应,生成乙酰羟胺,然后,与三氯化铁在酸性溶液中反应,形成红色羟肟酸铁络合物。颜色深度与剩余乙酰胆碱的量成正比。在波长520 nm 比色定量,由水解的乙酰胆碱的量计算胆碱酯酶活性。3仪器
3.1分光光度计,10 mm比色杯。
3.2比色管,10 mL。
3.3普通漏斗,40 mm.
3.4恒温水浴箱,控温士0.5C。
3.5采血针头。
3.6血色素吸管,有20 pL刻度。
4试剂
本标准所用试剂均为分析纯试剂。
4.1实验用水,蒸馏水或具同等纯度的去离子水。
4.2盐酸,Pzo=1.19 g/mL.
4.3盐酸溶液(1+2)。
4.4碱性羟胺溶液,临用前将139 g/L盐酸羟胺溶液和140 g/L氢氧化钠溶液等体积混合。
5采祥、运输和保存
5.1用血色素吸管,取耳垂血20 pL,注入比色管中(事先加入0.98 mL磷酸盐缓冲液),立即进行测定。
5.2如不能立即测定,可静脉取血0.5 mL,注入玻璃管中(含肝素或草酸钾抗凝剂),混匀。于保温瓶中加冰运送,置于4C冰箱中可保存一周。
6分析步骤
样品测定按下表进行。
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《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法羟胺三氯化铁法》(WS-T66-1996).pdf | 225K |
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