GA_T 1662-2019 法庭科学 硅藻检验技术规范 微波消解-真空抽滤-显微镜法

GA_T 1662-2019 法庭科学 硅藻检验技术规范 微波消解-真空抽滤-显微镜法 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会提出。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会法医检验分技术委员会（SAC/TC 179/SC 6）归口。 范围 本标准规定了法医学硅藻检验的微波消解-真空抽滤-显微镜法。 本标准适用于法医学尸体器官组织及水样中硅藻的定性定量检验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 26814-2011 微波消解装置 GA/T 147-1996 法医学尸体解剖 GA/T 148-1996 法医病理学检材的提取、固定、包装及送检方法 JJG 550-1988 扫描电子显微镜试行检定规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 硅藻 diatom 一种水生单细胞植物，大小一般在1μm～500μm之间。 4 方法原理 本方法利用硅藻细胞壁硅质具有耐强酸的特性，采用微波消解去除有机质，真空抽滤富集硅藻，光 学显微镜（以下简称为光镜）或扫描电子显微镜（以下简称为扫描电镜）分析硅藻种类和含量。 5 实验室条件 5.1 检材提取室（或解剖室） 5.1.1 设备 5.1.1.1 基本设备 符合GA/T 147-1996中附录A的要求。 5.1.1.2 自来水过滤装置 自来水出口应加装滤膜孔径小于1μm的过滤装置。 5.1.2 实验耗材 5.1.2.1 器械 符合GA/T 147-1996中附录B的要求。 5.1.2.2 器皿 包括： a) 塑料试管； b) 塑料瓶； c) 塑料盒。 5.1.2.3 其它耗材 包括： a) 醋酸纤维滤膜：孔径 0.45μm； b) 载玻片； c) 胶带； d) 塑料吸管； e) 塑料袋； f) 毛刷。 5.1.3 试剂 甲醛（分析纯）。 5.2 硅藻检验室 5.2.1 仪器及设备 5.2.1.1 通风橱 通风橱应以耐酸、耐碱材料建造。 5.2.1.2 自来水过滤装置 见5.1.1.2。 5.2.1.3 微波消解仪 符合GB/T 26814-2011的要求。 5.2.1.4 真空抽滤装置 与消解液接触的部件用耐酸材料制造，满足多通道抽滤，各通道间压力均匀，可调压力范围为 –60KPa～–10KPa；滤杯安装拆卸方便，抽滤区域直径为14mm～20mm。 5.2.1.5 显微镜 5.2.1.5.1 光镜 配40倍和100倍物镜。 5.2.1.5.2 扫描电镜 配真空镀膜设备，符合JJG 550-1988 第2章规定的要求，且能在不同放大倍数条件下将样品抽滤区 域分为若干个视场，通过手动或自动方式拍摄每个视场图像。 5.2.1.6 电热板 可调节温度，最高加热温度不小于100℃。 5.2.2 量器具 包括： a) 分析天平：感量 0.01g； b) 量筒； c) 移液器。 5.2.3 实验耗材 5.2.3.1 器械 包括： a) 手术剪； b) 镊子； c) 手术刀； d) 骨锯； e) 骨刮匙。 5.2.3.2 器皿 包括： a) 塑料试管； b) 塑料瓶； c) 塑料盒； d) 塑料杯。 5.2.3.3 其它耗材 包括： a) 塑料吸管； b) 塑料袋； c) 醋酸纤维滤膜：孔径 0.45μm； d) 醋酸纤维膜滤杯:装有孔径 0.45μm 的醋酸纤维滤膜的滤杯； e) 尼龙滤膜：孔径 0.45μm； f) 尼龙膜滤杯：装有孔径 0.45μm 的尼龙滤膜的滤杯； g) 载玻片与盖玻片； h) 胶带； i) 扫描电镜样品座； j) 碳导电胶带。 5.2.4 纯水和试剂 5.2.4.1 纯水 不低于GB/T 6682-2008规定的二级水。 5.2.4.2 试剂 包括： a) 硝酸（分析纯）； b) 30％过氧化氢溶液（分析纯）； c) 氢氟酸（分析纯）； d) 无水乙醇（分析纯）； e) 乙酸-丁香酚混合试剂：乙酸（分析纯）和丁香酚（分析纯）按体积比 7:3 混合的溶液； f) 2mol/L 氢氧化钠溶液：用氢氧化钠（分析纯）和纯水配制。 6 检材提取和保存 6.1 注意事项 包括： a) 检材提取室应定期制备控制样品，控制样品制备方法和要求见附录 A； b) 控制样品制备、检材提取所使用 5.1.2 中的实验耗材均为一次性使用，避免交叉污染； c) 解剖前，使用经 5.1.1.2 过滤后的水冲洗尸体表面。 6.2 器官组织的提取和保存 6.2.1 胸、腹腔未开放尸体器官组织的提取和保存 6.2.1.1 提取部位和顺序 依次提取肝、肾、肺，必要时，再提取股骨等其它器官组织。 6.2.1.2 提取方法 各器官组织的提取方法如下： a) 肝脏：提取含有包膜的肝脏组织约 100g； b) 肾脏：提取一侧肾脏，尽量保持包膜完整； c) 肺脏：提取肺脏边缘组织约 100g； d) 骨骼：提取股骨 1 根，如股骨缺则提取胫骨，如胫骨缺则提取肱骨； e) 其它器官组织：按 GA/T 148-1996 规定的方法提取其它器官组织。 6.2.1.3 器官组织的保存 提取的器官组织分别装入合适的容器中，不加任何防腐剂，不能立即送检的应冷冻保存。 6.2.2 胸、腹腔开放尸体器官组织的提取和保存 6.2.2.1 提取部位和方法